每个人都以为安妮会是个男孩。但令他们失望的是，1533 年 9 月 7 日，她生下了一个女孩，也就是未来的伊丽莎白一世女王。[14]
安妮在宫廷臣民和民众中都不太受欢迎。她品味奢侈，挥霍 孟加拉国电话号码数据 无度，脾气暴躁。此外，她下一次怀孕时流产了。
1536 年初，阿拉贡的凯瑟琳去世。安妮知道，如果她不能很快生下儿子，凯瑟琳的死意味着亨利可以自由地与她离婚并合法地娶别人。事实上，亨利已经看上了一个人：简·西摩，安妮的伴娘之一。不幸的是，安妮再次流产——而且是个男孩。[15]亨利对凯瑟琳所做的，很快也对安妮做了——他把爱意转向了简，并把她搬进了王室。
1536 年 4 月，亨利出于嫉妒、对简的感情，或两者兼而有之，下令对安妮展开调查，[16]指控她犯有叛国罪。此外，还有几名男子被指控与安妮通奸。[17]甚至连安妮女王的兄弟乔治·博林也因涉嫌乱伦[18]和叛国罪而被捕。1536 年 5 月 2 日，安妮本人被捕并被关进伦敦塔。
在伦敦塔期间，安妮给亨利写了最后一封信[19]，其中部分内容如下：
但是，如果你已对我下定决心，不仅我的死亡，而且无耻的诽谤也必将为你带来你所期望的幸福，那么，我祈求上帝，他将宽恕你的大罪，同样也宽恕我的敌人，以及他们的工具，并且他不会在他的总审判席上严厉地要求你对我进行不王子般和残忍的对待，你和我都将很快出现在他的审判席上，我毫不怀疑（无论世界如何看待我），我的清白将被公开知道，并得到充分澄清。